نمونه سوالات باکتری شناسی + پاسخ
1- لوله ميكروسكوپ: استوا نه ايست كه عدسي چشمي در بالاي آن قرار دارد و در پا ئين اين لوله صفحه گردان قرار – : ()- : () ()- : – : – : – : – : – :
– : -: – : – : :
– (×) : بكشيد و عدسي را آنقدر پايين بياوريد تا درست روي اسلايد قرار گيرد، با كمك پيچ بزرگتر عدسي را بالا ببريد تا يك تصوير واضح ديده شود، اگر واضح نشد پيچ كوچكتر را در خلاف جهت تا ته بچرخانيد. اگر باز هم تنظيم نشد كندانسور را كمي بالا ببريد.
2- استفاده از عدسي High power (40×) : كندانسور را تا وسط پايين بكشيد، عدسي را تا روي اسلايد پايين بياوريد و با پيچ بزرگتر عدسي را بالا ببريد تا يك تصوير تار در ميدان ديده شود، با پيچ كوچكتر آنرا واضح كنيد و كندانسور را براي روشنايي مناسب بالا ببريد.
3- استفاده از عدسي با روغن ايمرسيون: بهتر است اسلايد رنگ شده خشك بكار رود. ابتدا يك قطره روغن در محل مورد نظر قرار دهيد، كندانسور را تا جايي كه ممكن است بالا ببريد و عدسي 100 را پايين بياوريد تا در تماس با روغن قرار گيرد ولي فشار ندهيد و به كمك پيچ كوچكتر تصوير را فوكوس كنيد.
ويژگي روغن ايمرسيون:
وقتي جرياني از نور از هوا گذشته و به شيشه ميرسد، مي شكند و وقتي از شيشه به هوا بر ميگردد دوباره اين شكستگي به جاي اول خود باز مي گردد. اين موضوع در درشتنمايي كم اثر زيادي ندارد اما در درشتنمايي بالا اين شكست نور نه تنها باعث محدوديت نور رسيده به عدسي مي شود بلكه باعث محدوديت قدرت عدسي نيز مي شود. اين شكست نور و محدوديتهاي آن به كمك روغن از طريق حذف هواي بين عدسي و شيء از بين مي رود چراكه خاصيت اپتيك روغن مثل شيشه است.
باکتری شناسی
سانتريفوژ
سانتريفوژ نمودن يكي از روشهاي جدا سازي است كه در آن با استفاده از نيروي گريز از مركز، قسمتهاي سبكتر يك محلول ، مخلوط ويا سوسپانسيون ، از قسمتهاي سنگينترآن جدا ميشود .
اساس عمل سانتريفوژ، حركت دوراني حول يك محور ثابت است . نيروي سانتريفوژ يا Relative Centrifugal Force(RCF)بستگي به شعاع و و سرعت دوران داشته ، با فرمول زير محاسبه و واحد آن نيز بر اساس ضريبي از gravity) g ) بيان ميشود . ( بطور مثالg ×500)
RCF= 1.118 × 10‐5 × r × (rpm) 2
5‐1.118×10 مقدارتجربي قراردادي
= r شعاع سانتريفوژ برحسب سانتيمتر
مقدارشعاع، از مركز چرخش سانتريفوژ ( محور ) تا نمونه سوالات باکتری شناسی لوله درون سانتريفوژاندازه گيري ميشودسرعت چرخش برحسب دور در دقيقه = rpm
نيروي سانتريفوژ RCF را ميتوان به وسيله نموگرام نيز تعيين نمود
در اين حالت با كشيدن خطي كه از شعاع سانتريفوژ و g مورد انتظار عبور مي كند و ادامه آن، سرعت بدست مي آيد. بعنوان مثال در شكل فوق براي بدست آوردن قدرت 500g در سانتريفوژي كه شعاع آن 75 ميلي متر است، لازم است سرعت روي 2500 دور در دقيقه تنظيم گردد.
انواع سانتريفوژ :
(Horizontal‐ head /Swinging‐ ) سانتريفوژ هاي شناور
bucket و سانتريفوژ هاي زاويه ثابت ، انواعي از سانتريفوژ هستند كه بيشتر در آزمايشگاههاي تشخيص طبي استفاده ميشوند .
در سانتريفوژ هاي شناور، لوله ها در حالت توقف وضعيت عمودي و در حال حركت وضعيت افقي دارند.
در سانتريفوژهاي زاويه ثابت ، لوله ها در همه حال داراي زاويه ثابت نسبت به محور سانتريفوژ ميباشند. سرعت اين نوع سانتريفوژ
، مي تواند نسبت به مورد قبلي بيشترباشد ولي در زمان چرخش بعلت مقاومت به هوا ، درون آن گرماي بيشتري ايجاد شده و دما بالا مي رود.
انتخاب سانتريفوژ در آزمايشگاه بايد با توجه به نوع مصرف ( مانند سرعت مورد نياز، حداكثر دماي قابل قبول و…) و نيز مختصات فني مندرج در كاتالوگ دستگاه صورت گيرد.
نكات مهم در استفاده از سانتريفوژ :
در كار روزانه نبايد سانتريفوژ را با درب باز به كار انداخت .
استفاده از لوله هاي مناسب و توصيه شده سازنده و رعايت توازن لوله ها و حجم نمونه ها هنگام استفاده از سانتريفوژ از نكات اساسي در استفاده صحيح سانتريفوژ ميباشد . بطور معمول وزن لوله هاي حاوي نمونه كه مقابل هم قرار گرفته اند نبايد بيش از
1% متفاوت باشند. وزن مجموع لوله نمونه سوالات باکتری شناسی حاوي نمونه نبايد از وزن تعيين شده سازنده براي سرعت خاص ، تجاوز نمايد .
لازم است درب لولههاي حاوي خون قبل از سانتريفوژ بسته شود تا از پخش آئروسل در محيط جلوگيري گردد . از استفاده از اپليكاتورهاي چوبي جهت خارج كردن لخته قبل از عمل سانتريفوژ به علت افزايش احتمال هموليز بايد خودداري شود .
نگهداري و كنترل كيفيت سانتريفوژ :
تميز نگهداشتن سانتريفوژ در كاهش انتشار آلودگي ها بسيار مهم است و بايد در فواصل زماني مشخص انجام شود .
براي كنترل كيفيت سانتريفوژ لازم است موارد زير بررسي گردد:
سرعت سانتريفوژ : ابزار سنجش سرعت سانتريفوژ، تاكومتر است .سرعت سانتريفوژ بايد حداقل هر سه ماه يكبار بررسي شده و ميزان سرعت اندازه گيري شده نبايد بيش از 5% با سرعت مورد انتظار (سرعت انتخابي هنگام كار با سانتريفوژ ) متفاوت باشد .
براي بررسي سرعت سانتريفوژ با تاكومتر مراحل زير انجام ميشود
دانلود رایگان نمونه سوالات باکتری شناسی با جواب پی دی اف pdf
قفل سانتريفوژ را در حالتي قرار دهيد كه در حال باز بودن در ، چرخش انجام شود.
كاغذ مخصوص همراه تاكومتر را نزديك مركز محور سانتريفوژ ( نه در روي مركز محور) بچسبانيد. اين كار باعث مي شود در هر بار چرخش ، نور يكبار از كاغذ مخصوص به تاكومتر باز تابيده شود.
سانتريفوژ را با دور مورد نظر تنظيم نموده و روشن كنيد.
تاكومتر را در فاصله مناسب نسبت به كاغذ نشاندار نگهداشته و آنرا روشن كنيد.
هنگاميكه عدد نمايش داده شده روي تاكومتر ثابت ماند ، آن را يادداشت نموده با سرعت انتخاب شده اوليه مقايسه نمائيد .
زمان سنج سانتريفوژ: بهتر است زمان سنج بصورت هفتگي در مقابل زمان سنج كاليبره مورد بررسي قرار گيرد. براي اين امر زمان سنج را در زمانهاي مختلف تنظيم وبا كرونومتر مقايسه كنيد . اعداد حاصله نبايد بيش از 10% با زمان مورد انتظار متفاوت باشد.
كنترل دما : برخي سانتريفوژ ها هنگام كار ايجاد حرارت زياد در محفظه داخل سانتريفوژ مينمايند و اين دما ميتواند بر كيفيت نمونه و غلظت كميت هاي آن تاثير گذار باشد لذا هنگامي كه اندازه گيري كميتي مورد نظر است كه به دما حساس ميباشد، بهتر است از سانتريفوژ يخچال دار استفاده شود . براي كنترل دما ، ميتوان در لوله آزمايش ، آب مقطر ريخته و دماي آنرا تعيين نمود. سپس لوله در سانتريفوژ قرار گرفته و دستگاه با دور مشخص روشن ميشود . پس از مدت مقرر ، دماي آب داخل لوله مجددا اندازه گيري مي شود . دماي سانتريفوژهاي يخچال دار ميبايد هر ماه بررسي شده و ميزان دماي اندازه گيري شده نبايد بيش از 2 درجه سانتي گراد با دماي مورد انتظار متفاوت باشد .
يخچال
براي استفاده صحيح از يخچال بايد به موارد زير توجه داشت :
1- يخچالها بايد طوري قرار گيرند كه هواي كافي از مبرد كه عموما در پشت يخچال است ، عبور نمايد.
2- دماي يخچال بايد روزانه دو بار در ساعات مشخص، اندازهگيري و ثبت شود. با توجه به امكان وجود اختلاف دما، درجه حرارت بخشهاي مختلف يخچال بايد بررسي گردد.
3- محفظه يخ بايد هرماه بررسي و در صورت وجود يخ تميز شود.
4- غبار روي مبرد ماهانه پاك شود.
5- لاستيك دور در، مرتبا بررسي شود. ترازو
عواملي مانند دما، رطوبت ، نيروي جاذبه و هوا مي توانند در اندازهگيري صحيح وزن مواد تداخل نمايند.
براي نگهداري و براي استفاده صحيح از ترازو بايد به موارد زير توجه داشت :
1- ترازو بايد در محلي دور از جريان هوا ، دقيقا در وضعيت افقي و در مكاني ثابت و بدون ارتعاش قرار گيرد .
2- ترازو بايد پيش از هر اندازه گيري صفر شود.
3- ظرفي كه براي توزين استفاده شود بايد تا حد امكان كوچك باشد ( با توجه به حجم ماده مورد توزين ). از بكار بردن ظروف پلاستيكي بايد خودداري شود.
4- ظرف و ماده مورد توزين بايد قبل از توزين به حرارت اتاق رسانده شوند.
5- دست را نبايد وارد محفظه توزين نمود زيرا باعث گرم شدن نمونه سوالات باکتری شناسی مي شود. بهتر است از پنس استفاده شود.
6- ماده مورد توزين را بايد وسط كفه قرار داد.
7- ترازو بايد تميز نگه داشته شود. در صورت ريختن مواد شيميايي بايد سريعا محل را تميز نمود . براي پاكسازي عوامل بيولوژيك از الكل 70 درصد استفاده مي شود.
8- براي اطمينان از صحت اندازه گيري لازم است علاوه بركاليبراسيون داخلي ، در فواصل زماني مشخص با استفاده از وزنههاي كاليبره با وزن معين، صحت عملكرد را بررسي كرد يا از طريق مراجع كاليبراسيون معتبر ، اقدام به كاليبراسيون دستگاه نمود. ميكرو پيپت / سمپلر 9- چگونگي كاربري
10- پس از محكم كردن نوك سمپلر مناسب به سمپلر ، ابتدا دكمه كنترل / فشار(Control button/Push button) سمپلر را به آرامي تا توقف اول دكمه، پائين مي آوريم ، در همان حال نوك سمپلر را چند ميليمتر(حدود 3 ميلي متر وبسته به حجم سمپلر) در مايع فرو برده و دكمه فشار را به آرامي رها مي كنيم تا مايع وارد نوك سمپلر شود، براي تخليه در لوله يا ظرف مورد نظر ، با فشار مجدد دكمه تا توقف اول، محلول را با تماس به جداره ظرف به آرامي خارج كرده و پس از 3-1 ثانيه با فشار تا توقف دوم ، باقيمانده محلول را نيز كاملاً خارج مي نمائيم.
11- جهت رسيدن به حداكثر دقت و صحت براي سمپلرهاي با حجم 10 ميكروليتر و بيشتر ، توصيه مي شود قبل از انتقال حجم نمونه ،
2 الي3 بار عمل برداشت و تخليه از نمونه تكرار شده تا كاملا جدار داخلي نوك سمپلر به نمونه آغشته شود و سپس حجم مورد نظر از نمونه منتقل شود.
12- براي حجم هاي كمتر از 10 ميكروليتر بهتر است، فقط يكبار برداشت با نوك سمپلر Unwetted Tip كه خشك و بدون آغشتگي به نمونه باشد، انجام شده و پس از تخليه در محل مورد نظر، جهت اطمينان از تخليه كامل تمامي حجم درون نوك سمپلر، با محلول موجود در ظرف شسته شود.
13- بايد در نظر داشت، عملكرد مطلوب سمپلر فقط با استفاده از سر سمپلر هاي نو و يكبار مصرف بدست مي آيد و از شستشو و استفاده مجدد از سر سمپلرها، ميبايست خودداري نمود.
تست باکتری شناسی با پاسخ
-14
15- نكات مهمي كه در كار با سمپلرمي بايست رعايت شود، عبارتند از :
16- اطمينان از اتصال كامل نوك سمپلر به سمپلر
17- عمود نگهداشتن سمپلر در زمان مكش
18- تخليه محلول با تماس نوك سمپلر به جداره ظرف تحت زاويه 10 تا 40 درجه
19- رها كردن آرام دكمه در زمان پر يا خالي كردن محتويات نوك سمپلر
20- كشيدن كناره هاي خارجي نوك سمپلر پس از انجام مكش به جداره هاي فوقاني لوله به منظور حذف قطرات جزوه ویروس شناسی علوم ازمایشگاهی نوك سمپلر يا در صورت نيازخشك كردن قطرات باقي مانده در بخش خارجي آن به كمك پارچه اي بدون پرز(البته بايد مطمئن شد كه پارچه چيزي از محتويات داخل نوك سمپلر را به خود جذب نكند)
21- هنگام تخليه محلول پس از توقف اول (پائين آوردن دكمه كنترل تا مرحله اول) بايد كمي تامل كرد (3 -1 ثانيه) و سپس دكمه را تا توقف دوم پائين آورد.
22- درسمپلرهاي متغير (قابل تنظيم براي حجم هاي مختلف ) توصيه مي شود براي كاهش حجم و تنظيم حجم مورد نظر ، دكمه كنترل به آرامي تارسيدن به حجم انتخابي، چرخانده شود .
23- براي افزايش حجم بهتر نمونه سوالات باکتری شناسی دكمه كنترل را تا كمي بيش از حجم مورد نظر پيچاند و بعد در خلاف جهت با كم كردن حجم به مقدار مورد نظر رسيد.
روش جمع آوري نمونه مدفوع جهت تشخيص عفونت هاي انگلي
نمونه برداري بايد به نحوي انجام پذيرد كه امكان تشخيص و جداسازي هر انگلي وجود داشته باشد . تشخيص عفونتهاي انگلي بـه امتحـانميكروسكوپي مدفوع، ادرار، خون، خلط، بافت و در مواردي بررسي ماكروسكوپي نمونه استوار است. نمونه ها بايد در ظرف دهان گشاد تميز پلاستيكي يا مومي جمع آوري گردد. در پيچ ظرف بايد كاملا محكم باشد تا رطوبت نمونه حفظ گردد.
نمونه هانبايد با آب يا در ادرار مخلوط شود زيرا سبب بيحركت شدن تروفوزوئيت تك ياخته و يا موجب از بـين رفـتن آن ميگـردد.آلـودگياتفاقي نمونه با خاك يا آب ممكن است باعث گردد كه نمونه به ارگانيسم هاي داراي زندگي آزاد كـه نمونه سوالات باکتری شناسی در آب و ياخـاك مـي باشـندآلوده شده كه در اين مورد به آساني با تك ياخته هاي انگلي اشتباه ميشوند و جمع آوري نمونه از توالت فرنگي و …. نيز مناسب نميباشند.
تداخل مواد: بعضي از مواد مانند روغنهاي معدني ، باريم (كريستالها مانع مشاهده انگل به خصوص تك ياخته ها ميگردند) بيسموت ، آنتـيبيوتيك ( تتراسيكلين ) داروهاي ضد مالاريا ومواد قابل جذب تركيبـات ضـد اسـهالي درجداسـازي انگلهـاي روده اي تـداخل مـي كننـد0 بعدازمصرف مواد فوق بوسيله بيمار ، ممكن است براي مدت يك هفته تا چند هفته نتوان انگل راتشخيص داد0 معمولاً دو ماده اي كـه بـهمقدار زياد توسط بيماران مصرف ميگردد باريم وآنتي بيوتيك است كه تتراسيكلين باعث كاهش يا ازبين رفتن انگـل هـا( مخصوصـاً تـكياخته ها) مي گردد ودرچنين مواردي بايد نمونه برداري بعد از گذشت 7روز انجام شود0
آزمايش ميكروسكوپي نمونه هاي مدفوع Stool Examination
۱-آزمايش مستقيم
خلاصه :آزمايش مستقيم، آزمايشات ماكروسكپي مدفوع ، تهيـه لام مرطـوب بـا سـرم فيزيولـوژي و تهيـه لاممرطوب با لوگل را شامل مي شود كه در آزمايش ماكروسكپي قوام مدفوع به شكل Formed (شـكل دار )، Loose (شل يا نرم)يا Watery(آبكي) گزارش مي شود كه :
– – – – – – – :
– : /- ( ٪ ): :
()
فهرست مطالب