دانلود کامل ترین جزوه میکروبیولوژی ۲

جزوه تایپ شده میکروبیولوژی ۲

دانلود فایل

سید خلیل شکوهی کارشناسی ارشد امیر قائمی پیام نور علیپیام نور شعاع‌حسنی پیام نور کسری حمدی پیام نور مهدی محمدیان دانشگاه علمی –

:
:َ ( ) ( ) () :
( /) -( ) ( )

:
: تمـاس داده وسـپس آن رابصورت دوراني چرخانده تا خون به اندازه اي پخش شود كه به ضخامت واندازه مناسب برسد 0 اگر قطره به اندازه كافي بزرگ نباشد و يا خون لخته گردد، اين متد كارايي ندارد0 راه ديگر پخش كردن قطره خون استفاده از يك اپليكاتور يا گوشه اسلايد ديگر است 0 Puddle method : دراين روش امكان تخريب ارگانيسمها بيشتراست 0 دوسه قطره خون بوسيله تمـاس اسـلايد بـا قطـره خـون نـوكانگشت بر روي لام قرار گرفته ( نبايد انگشت را فشار داد) وبوسيله اپليكاتور يا گوشه لام ديگر پخش مي شودتا به ضخامت وقطر مناسب برسد0
نكته : اگر خون بدون ضدانعقاد جزوه میکروبیولوژی ۲ مي شود اسلايد را حدود 30 ثانيه بايد چرخاند تا رشته هاي فيبرين خارج شوند زيرا وجـود ايـنرشته ها پس از رنگ آميزي باعث محو شدن انگلها و يا عدم چسبيدن گسترش به لام ميشوند0

درروش Puddle مي توان از خون وريدي ( خون داخل سرنگ بدون ضد انعقاد) وخون حـاوي ضـد انعقـاد نيـز جهـت تهيـه گسـترشاستفاده كرد0 براي تهيه گسترش مناسب استفاده از خون تازه بدون ضد انعقاد توصيه ميگردد0
گسترشها مي بايست بصورت افقي دردماي اتاق خشك شوند واگر رطوبت زياد باشد استفاده ازانكوباتور توصـيه ميگـردد0 اسـلايده ا را نبايد دردماي C ◦37 خشك كرد (زيراRBC ها فيكس شده ودهموگلوبينه نمـي شـوند) وبايـد درمحلـي بـدور از گـرد وغبـار وآلـودگيوحشرات نگهداري نمود0 خشك شدن گسترش هاي ضخيم به حدود 12-8 ساعت زمان نياز داشته كه استفاده از يك پنكه اين زمـان رابه 4-1 ساعت تقليل مي دهد0
معمولاً گسترش هاي ضخيم قبل از 12-8 ساعت رنگ مي شوند، اگرچه اينكار شانس جداشدن خون از اسلايد را حين رنگ آميزي بسيار زياد ميكند0 مي توان درزمانيكه اسلايدهاي ضخيم خشك مي شوند گسترهاي نازك را جهت يافتن انگل مشاهده نمود0
قطر گشترش ضخيم بايد cm 2-5/1 وضخامت آن درحدي باشد كه نوشته هاي روزنامه ازپشت آن به سختي خوانده شوند وشـايع تـرينخطا درتهيه اين نوع اسلايد استفاده از قطره خون بزرگ است 0 نام بيمار روي گسترش ضخيم نوشته نمي شود زير درزمان دهموگلوبينـهشدن گسترش نوشته ها محو مي شوند 0
براي ثبت نام بيمار بايد ازقسمت مات لام و يا از قلمهاي مخصوص كه براي نوشتن روي شيشه بكارميروند استفاده كرد0
ازنمونه خون زير بافي كوت هم مي توان جهت تهيه گسترش نازك استفاده كرد كه بدليل كاهش پلاكتها دراين لايه احتمال خطاي مثبـتكاذب كاهش يافته ضمن آنكه پارازيتها دراين لايه تغليظ شده (Concentrated) ودرعفونتهاي خفيف امكان تشخيص بيشتر مي شود0 براي آماده ساختن گسترش به اين روش بايد خون حاوي ضد انعقاد را سانتريفوژ كرده وبوسيله پـي پـت ، لايـه پلاسـما وبـافي كـوت راخارج نمائيم، سپس لايه فوقاني گلبولهاي قرمز را با جزوه میکروبیولوژی ۲ برداشته وبا مقداري از پلاسماي باقيمانده ( حدودml 5/0 ) مخلوط كرده ونهايتاً از اين نمونه ، چهار اسمير

رنگ آميزي گيمسا Giemsa Staining مقدمه: استفاده از رنگ آميزي گيمسا براي رنگ آميزي گسترش نازك خوني جهت مطالعه و افتراق گلبولهاي سفيد، مرفولوژي گلبولهـاقرمز و همچنين رنگ آميزي گسترش خوني نازك يا ضخيم كه براي تشخيص انگل هايي همچون مالاريـا ، بابزيـا و… كـاربرد داشـته و توصيه مي گردد0 دانه هاي شافنر دررنگ آميزي رايت يا رايت گيمسا ندرتاً رنگ مي گيرند 0 در ايـن رنـگ آميـزي بـراي فـيكس كـردنگسترش بايد از متانول خالص بدون استن استفاده كرد0 PH بافرهاي گيمسا بايد خنثي (2/7-7) كه افتراق انگلهاي خوني را بهتر نمايان سازد براي اينكار مي توان آب مقطر يا آب ديونيزه را بافره كرد وبراي رقيق كردن گيمسا بكار برد0
براي رنگ آميزي بروش گيمسا از غلظتهاي مختلف رنگ وزمانهاي مختلف جزوه میکروبیولوژی ۲ مي شـود 0 درمواقـع اورژانـس غلظـت 5/7% گيمسـابمدت 15 دقيقه براي رنگ آميزس گسترش ضخيم مناسب بنظر ميرسد0 نمونه گيري ونحوه تهيه گسترش هاي خوني :
نمونه گيري ازطريق مويرگي يا وريدي امكان پذير است 0 معمولاَ غيز از موارديكه امكان تهيـه اسـمير خـوب وجـود نـدارد ، خـونگيريوريدي توصيه نمي شود0 ضد انعقاد مناسب EDTA است كه كمترين اثررا روي رنـگ آميـزي دارد 0 اگـر نسـبت ضـد انعقـاد بـه خـوننامناسب باشد ، چسبيدن خون به اسلايد ( هنگام تهيه گسترش ) وبا رنگ آميزي آن دچار اشكل شده واين مسئله درموارديكه نسبت ضـدانعقادبه خون زياد است بيشتر ديده مي شود 0 روش كار:
طرز تهيه با فرهاي گيمسا ، آب بافره ورنگ گيمسا
Stock Giemsa Buffer (0.67M),Sterile
-Na2Hpo4 59.24g
-NaH2po4,H2O 36.38g

خلاصه جزوه میکروبیولوژی ۲ کتاب پی دی اف کامل دانلود رایگان

Deionized water 1000ml- اين محلول را اتوكلاو نموده ويا بافيلترهاي 0.2 ميكرومتر صاف كرده ودرحرارت اتـاق نگهـداري مـي نمـائيم 0 بافراسـتريليكسال پايدار است 0
Buffered water(working Giema buffer ) 0.0067M
Stock Giemsa buffer 10ml
Deionized water 660 ml

قبل از استفاده حتماً PH اندازه گيري واگر درحد قابل قبول (2/7 -7) نبود بافر جديد تهيه شود0 اين بافر دردماي اتاق يكماه پايدار است.
طرز تهيه رنگ از پودر گيمسا :
Stock Giema stain . كليه جزوه میکروبیولوژی ۲ شيشه اي مورد استفاده بايد تميز وخشك باشد Absolute methanol, acetone- free 270 ml Giemsa stain powder 3.0 g
Glycerol 140 ml
موارد فوق را بترتيبي كه ذكر شده به هم اضافه ودرب ظرف را محكم نموده و با زاويه روي شيكر گذاشته تا كاملاً مخلـوط شـوند0 بطور متوسط حداقل 14 روز و روزي 30 تا 60 دقيقه محلول فوق بايد مخلوط شود0 محلول درون ظـرف دربسـته درحـرارت اتـاقپايدار است وبا گذشت زمان كيفيت اين رنگ بهتر ميشود0 قبل از مصرف ، شيشه حاوي رنگ را بخوبي مخلوط نموده و با استفاده از كاغذ صافي شماره 1واتمن صاف نموده ودرظرف تيره رنگي جمع آوري مي نمائيم 0 اين محلول با رقت مناسب براي رنـگ آميـزيآماده مي باشد0
كنترل كيفي :
براي كنترل كيفي از نمونه خون حاوي EDTA كه درميدان X 100 حداقل داراي يـك انگـل باشـد( مخصوصـاً پلاسـموديومويواكس يا اوال ) به تعداد زياد گسترش نازك تهيه كرده وبعد از فيكس كردن توسط متانول درفريزرC70- نگهداري مي كنيم.
لازم به ذكر است نگهداري اسلايدها درگرما باعث اختلال دررنگ آميزي مناسب مي شود.
هر چند يكبار جهت كنترل كيفي گيمسا، يكي از لامها را از فريزر خارج ساخته وپس از به دما رسيدن، رنگ مي كنـيم 0 اگـرگلبولهاي سفيد، گلبولهاي قرمز و پلاكتها خوب رنگ بگيرند، نشاندهنده كيفيت مناسب رنگ مي باشد.
رنگ آميزي اسلايد هاي نازك
1- گسترش را درمتانول خالص وبدون رطوبت بصورت عمودي براي 5-1 ثانيه فروكرده وسپس درمجاورت هوا خشك مي كنيم 0 بـرايفيكس نمودن گسترش Pseudothick فقط قسمت نازك گسترش را درالكل فرو كرده وسپس خشك مي نمائيم0
2- اسلايد نازك را درظرف حاوي رنگ گيمسا گذاشته وپس از طي شدن زمان مربوطه، اسلايدها را جداگانه ازظرف رنگ درآورده وپـس از خارج ساختن رنگ اضافي توسط يك كاغذ جاذب، با داخل وخارج نمودن اسلايد درظـرف حـاوي آب بـافره بـاPH 2/7-7 آبكشـي مي نمائيم 0
3- لامها را درحالت عمودي خشك مي نمائيم 0 (استفاده از پنكه زمان خشك شدن را كوتاهتر مي نمايد0) رنگ آميزي گسترشهاي ضخيم
بعد از خشك شدن گسترش ها ( حدود 12-8 ساعت بعد از تهيه اسلايد) بدون فيكس كردن، آنها را درظرف حاوي گيمسا گذاشته و پس از گذشت زمان لازم هر اسلايد را جداگانه ازظرف خارج ساخته و پس از جذب رنگ اضافي توسط كاغـذ جـاذب بـا آب بـافره بـراي 5 دقيقه آبكشي مي نمائيم سپس آنها را درحالت عمودي قرار داده تا خشك شوند، لازم به ياد آوريست پنكه زمـان خشـك شـدن جزوه میکروبیولوژی ۲ ضخيم را كاهش مي دهد0 اگر تشخيص سريع لازم باشد، مي توان اسلايد ضخيم را كمي نازكتر تهيـه كـرد كـه درعـرض يكسـاعت خشك وبعد رنگ آميزي شوند0 :

دستورالعمل هاي مديريت ايمني در آزمايشگاه مقدمه
كار در آزمايشگاه علاوه بر خطرات كار در ساير موسسات خطر ابتلا به انواع عوامل بيماريزاي بيولوژيك با منشا خون و ساير مايعات بدن، مواد شيميايي، راديواكتيو، سرطانزا و غيره را نيز در بر دارد. اين عوامل مي توانند از طرق مختلف مانند ترشح و پاشيدن، بلع و تنفس، تماس مستقيم با مخاط و يا پوست ، بريدگي در اثر وسايل تيز و برنده و نيز وسايل شيشه اي شكسته، ايجاد جراحت در اثر فرورفتن سوزن در پوست، برداشت مايعات با پيپت به وسيله دهان و نيز ايجاد خراش توسط حيوانات آزمايشگاهي و يا ايجاد سوختگي و تاول در اثر تماس با دستگاههايي همچون اتوكلاو و فور سبب ايجاد بيماري مي گردد. از اينرو شناسايي اصول ايمني درزمينه مديريت ايمني وطراحي ساختاربرنامه ايمني واجراي آن درآزمايشگاه ازضروريات كار در آزمايشگاههاي تشخيص پزشكي مي باشد. ذكر اين جزوه میکروبیولوژی ۲ ضروريست كه مدير آزمايشگاه يا مدير مؤسسه پزشكي ، مسئول حفظ ايمني همه كاركنان و مراجعه كنندگان به مؤسسه يا آزمايشگاه مي باشد. مباحث مربوط به استقرار برنامه ايمني در 5 بخش زير توضيح داده شده است.
1- شناسايي و طراحي ساختاربرنامه ايمني واجراي آن درآزمايشگاه
2-پذيرش ،آگاهي و اجراي برنامه ايمني توسط تك تك افراد (نيروهاي فني ، خدماتي و غيره)
3- شناسايي فرآيندضدعفوني وسترون سازي ودستگاههاي مربوطه وبررسي صحت فرآيند در فور و اتوكلاو و اجراي آن درآزمايشگاه
4- اصول كلي حفاظت وپيشگيري از آلودگي كاركنان ومحيط آزمايشگاه
5- شناسايي برنامه مديريت پسماند واجراي آن درآزمايشگاه

بخش1 :شناسايي وطراحي ساختاربرنامه ايمني واجراي آن درآزمايشگاه
ساختار برنامه ايمني از اجزا مختلفي تشكيل مي شود كه شامل 1- خط مشي ايمنيSafety policy 2- مسئول ايمنيSafety officer 3- راهنماي ايمنيSafety manual 4 – كميته ايمني Safety committee 5 – آموزش ايمنيSafety training 6- گزارش حوادث
چك ليست ايمني -8 Incorporate safety into proceduresاجراي كامل برنامه ايمني در روشهاي كاري – 7 Accident report
.مي باشند (Continious improvement)Documentationو 9 – مستندسازي Safety checklist
خط مشي ايمني: همان طراحي ساختار برنامه ايمني بر اساس وسعت و فضاي كاري، تعداد كاركنان، تعدادبخشها و تنوع فعاليتها در آزمايشگاه را شامل مي شود.
مسئول ايمني: ابتدايي ترين اقدام در اجراي برنامه ايمني تعيين مسئول ايمني است كه برخورداري شخص از توانائي علمي و فني و احاطه بر كليه فعاليتها (سوپروايزر، مسئول كنترل كيفي ، و…..) همچون تعيين و استقرار خط مشي ايمني، تهيه مكان كاري ايمن، تامين بودجه مورد نياز، مسئوليت استقرار برنامه ايمني، تهيه مواد و تجهيزات مورد لزوم از اهم وظايف وي مي باشد و ريز مسئوليتهاي وي بشرح زير مي باشد: 1- طراحي ساختار برنامه ايمني بر اساس وسعت و فضاي كاري، تعداد كاركنان، تعدادبخشها و تنوع فعاليتها
2- اطمينان از گذراندن دوره هاي آموزشي لازم توسط كاركنان
3- تهيه مواد و تجهيزات ايمني مورد نياز
4- اطمينان از دريافت كتابچه هاي راهنما و دستورالعملها توسط تمامي كاركنان
5- بررسي و پيگيري حوادث و اطمينان از اجراي فرآيند آلودگي زدائي دربروز حوادث،
6- مديريت پسماند
7- بازرسي دوره اي و متناوب در مورد چگونگي اجراي برنامه ايمني
8- آموزش برنامه ايمني

دانلود رایگان خلاصه کتاب میکروبیولوژی 2

راهنماي ايمني: مجموعه اي از دستور العمل ها جزوه میکروبیولوژی ۲ كه شامل دستورالعملهاي حفاظت فردي، استريليزاسيون، بررسي و پيگيري حوادث، مديريت پسماندو … مي باشد كه مجموعه حاضر را مي توان نوعي راهنماي ايمني بحساب آورد. راهنماي ايمني مشتمل بر موارد زير مي باشد:
1ـ تعيين سياست ايمني در آزمايشگاه
2- تعيين مسئوليت ها و تفويض اختيار درباره افسرايمني ، كميته ايمني (تشكيلات ، نحوه تشكيل كميته ، مدت زمان و شرح وظايف كميته از جمله مشخص نمودن خطرات آزمايشگاهي ، بررسي گزارش اتفاقات خطر آميز) بررسي گزارش بازرسي هاي اتفاقات خطرآميز تدوين پشنهادات براي كاهش خطر
3ـ پيشگيري و خدمات اورژانس و اضطراري شامل : آزمايشهاي پزشكي قبل از شروع كار ، آزمايشهاي ادواري طي دوره كار ، واكسيناسيون و مصون سازي قبل از كار و تجديد واكسيناسيون در طي دوران كار، بررسي واكنشهاي دانلود کامل ترین جزوه اصول نگهداری مواد غذایی و تعيين مواد آلرژي
4ـ تدوين استانداردهاي اساسي براي اتوكلاو، سانتريفوژ، لباس و اونيفرم، مواد آرايشي، خوردن و آشاميدن، حفاظت از چشم ، صورت، مواد غذايي، وسايل شيشه اي ، شستشوي دست و… كشيدن سيگار
5ـ پيشگيري از آتش سوزي و كنترل آن شامل محل قراردادن دستگاههاي آتش نشاني ، تستهاي ادواري، نقشه تخليه ساختمان ، مته هاي آتش نشاني و محل استقرار آن، سيستم اعلام خطر آتش سوزي، سطل هاي شن ، پتوهاي ضدآتش، كنترل آتش سوزي درجه 1، درجه 2 ، درجه 3 6ـ كنترل خطرات الكتريكي
7ـ كنترل خطرات مكانيكي شامل قراردادن و انبار كردن وسايل سنگين در جاي مناسب، پاك كردن راهروها و كف كريدورها، سوزن و لانست ، نحوه كار ، نحوه دورريزي
8-كنترل خطرات شيميايي و طبقه بندي آن كه عبارتند از : مواد سوزان و تباه كننده، مواد سمي، مواد سرطان زا، مواد قابل اشتعال، مواد قابل انفجار
9ـ كنترل خطرات بيولوژيكي در روشويي ها، حوله ها ،، B.S.C ، دور ريزي مواد عفوني و آلوده، ضد عفوني كردن ، و نحوه دور ريزي مواد يكبار مصرف
10ـ مقررات عمومي براي حفاظت افراد مانند حفاظت شخصي، استفاده از روپوش ، گان ، دستشكش ، ماسك ، عينك محافظ، استفاده از پيپت، كشيدن سيگار، استفاده از لنز چشمي، استفاده از كفش (راحتي )، نحوه استفاده از موي بلند ، روسري ، مقنعه ، ناخن هاي بلند و شستشوي مرتب دست بعد از تماس با بيمار و قبل از خوردن و شتشوي دست در شش جهت قبل از ترك آزمايشگاه
11ـ تميز كاري و خانه داري مناسب شامل تميز نگهداشتن محوطه كار ، بخشهاي مختلف ، كف اتاق ، روي ميزهاي كار و ديوارهاو… ، رعايت استانداردها و مقررات خاص براي همه كاركنان، نگهداري تكه پارچه ها ، تنزيب و ملافه در محل خاص ، نگهداري مواد قابل اشتعال در جا زباله هاي در بسته، عدم استفاده از رادياتورها، كنار لوله بخاري و وسايل گرمازا براي خشك كردن لباس و حوله و…، جلوگيري از تجمع زباله ها در يك گوشه اتاق يا راهرو ، عدم استفاده از آويزه هاي زينتي، ضد عفوني روزانه كليه ميزهاو محل كار با مواد مناسب (براي هر بخش و محل خاص بايد از ماده ضدعفوني خاصي استفاده كرد)، اوت وسايل شيشه اي شكسته يا لب پريده، نحوه : : – – ()
– – : : ً :
– – – :()
: :
– – ()
– – –